本文對泡沫冷凍干燥保護劑的配方及過程參數進行了四因素三水平的正交實驗研究，確定了各因素對發泡效果影響的顯著性。其中發泡真空度對發泡高度的影響最顯著，明膠及Pluronic-F68 用量其次，擱板溫度的影響最不顯著。應用發泡效果最佳的配方及過程參數，進行了1 ml 樣品的泡沫真空冷凍干燥實驗，一次干燥時間3 h、二次干燥時間12 h，所得樣品剩余含水量小于2.0%。

　　冷凍干燥是生物制藥、高檔食品和化妝品生產以及超細粉體生產領域廣泛應用的技術之一。由于其制品具有保存期限長、使用方便、便于運輸、可常溫保存等優點，在疫苗、微生物的保存中冷凍干燥方法也經常被運用。與其它常見干燥方法如烘干法相比，凍干生產的周期長，能耗大，這些缺點制約了凍干技術的應用范圍。

　　為提高凍干生產的效率、減少其能耗同時又能保持其制品的優點，近年來有國外學者針對獸用疫苗提出了一種新的干燥方法，泡沫真空冷凍干燥，其特點是：對物料進行前期預處理，載入發泡劑，配合抽真空等手段使物料膨松成泡沫狀，然后在真空下加熱完成一、二次干燥，從而除去物料中的水分。新方法由于發泡后物料的比表面積顯著增大，傳熱、傳質情況能得到明顯改善，從而極大地提高了干燥速率。運用此方法，國外學者已干燥保存了流感病毒、支原體、牛瘟病毒等，取得了良好的實驗效果，還有學者嘗試采用此方法干燥食品。

　　國內目前關于泡沫真空冷凍干燥研究的公開報道還很少見。為了促進泡沫真空冷凍干燥技術在我國的應用和推廣，本文擬對泡沫真空冷凍干燥工藝開展實驗研究，確定影響發泡效果的主要因素，并以發泡效果最佳的工藝參數進行瓶裝1ml樣品的泡沫真空冷凍干燥。

1、材料和方法

　　1.1、實驗材料

　　本文實驗采用的泡沫真空冷凍干燥配方包含40%蔗糖、2%精氨酸、1%甘油、0.025 mol·L^-1 磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)以及一定比例的Pluronic-F68、明膠，預期用于雞新城疫活疫苗的保存。其中Pluronic F-68 作為發泡劑，在系統抽真空時使溶液膨松成泡沫狀；明膠作為穩定劑，使產生的泡沫結構穩定。

　　1.2、實驗裝置

　　所使用的冷凍干燥裝置簡圖如圖1 所示。擱板下面布置有電加熱器，其功率輸出由PLC 控制，從而控制擱板的溫度。制冷系統采用單級蒸汽壓縮式，混合制冷工質在壓縮機內被壓縮成高溫高壓的蒸汽后進入冷凝器中，冷凝后的低溫低壓流體分為兩路，分別在兩個手動節流閥中進行節流、調節流量，隨后兩股流體分別進入凍干箱中的擱板和冷阱盤管中進行制冷，完成一個制冷循環，實驗時冷阱溫度約為-60 ℃。真空泵為三相供電，接在西門子MICROMASTTER440 變頻器的輸出端，通過控制真空泵的抽速，配合真空微調閥開度調整，達到精確控制干燥箱真空度的目的。使用Agilent 數據采集儀每6 秒鐘采集一次樣品內部溫度數據。樣品在擱板上預冷后開始抽真空發泡，由于抽真空速率過快會引起溶液噴瓶，同時也為了得到更好的發泡效果，發泡過程需分階段進行，先使干燥箱內達到一定的真空度，保持兩分鐘后將真空控制在10 Pa以內。

圖1 實驗裝置簡圖

　　1.3、實驗方案

　　泡沫真空冷凍干燥過程如下：預冷→發泡→凍結→一次干燥→二次干燥→密封。實驗包括兩部分，第一部分通過設計正交實驗確定影響發泡效果的因素，第二部分在第一部分基礎上進行，以最佳發泡效果對應的工藝條件進行1 ml 樣品的泡沫冷凍干燥。通過文獻調研及初步實驗，作者確定了Pluronic F-68 以及明膠的含量、擱板溫度、真空度等四個會影響發泡效果的因素。因素水平范圍如表1 所示，正交實驗表按L9 (34)安排。每個實驗重復三次。發泡效果的指標為發泡高度和一次干燥時間，發泡高度越高、一次干燥時間越短，說明所選取的工藝條件越佳。第二部分實驗的步驟如下：1)取1 mL 樣品溶液裝在Φ22 mm西林瓶里，裝液高度約2.5 mm，半蓋上瓶塞，放置于擱板上，預冷30 min；2)抽真空發泡；3)一次干燥3 h；4) 擱板溫度升溫至32 ℃進行二次干燥，時間12 h；5)樣品的剩余含水量測定采用烘干稱重法，電子天平采用梅特勒- 托利多的AL104型，精度為0.1 mg，實驗重復三次。

表1 正交試驗因素表

圖2 實驗過程溫度曲線

2、實驗結果與討論

　　實驗過程中擱板和樣品內溫度曲線如圖1所示。在一次干燥過程中溫度升到10 ℃左右時樣品溫度會出現突然的下降，是由于局部自由水分布不均勻導致泡沫結構發生相變所致。在樣品溫度趨于擱板溫度時認為一次干燥過程結束，隨后升高擱板溫度進行二次干燥。試驗中未遭遇噴瓶現象，即泡沫溢出瓶口。表2 給出了不同工藝條件下的一次干燥時間和發泡高度，這兩組數據之間沒有明顯相關性，即在試驗條件下并非發泡高度越高一次干燥時間就越短。9 組實驗的一次干燥時間均在120~145 min 之間，各組時間的差別不大。表3 列出了對發泡高度的方差分析。根據所求得的F 值可知，因素B 發泡采用的真空度對發泡高度的影響最顯著，其次因素C 明膠含量、D 發泡劑含量對發泡高度的影響也比較顯著，而因素A擱板溫度的影響不顯著。在因素組合為A1B1C2D3，即擱板溫度為15 ℃、發泡真空度為50 Pa、明膠用量為3%、Pluronic F-68 用量3%，發泡效果最好。采用該因素組合進行第二部分實驗，得到的干燥樣品的剩余含水量均小于2%，該水分含量能夠保證樣品在較高環境溫度(如37 ℃)下安全儲存。

表2 不同工藝條件下的發泡高度及一次干燥時間

表3 發泡高度顯著性分析表

　　本文在影響因素的選擇方面參考了文獻和。參考文獻的F68 和明膠用量發泡效果均不理想，文獻對F108、F87、F68 三種發泡劑的效果進行了實驗研究，發現含量在3%(W/V)時發泡效果最佳，本文所得F68 最佳用量與該文一致。文獻的泡沫冷凍干燥將真空抽到50 mTorr，而根

　　據作者的初步實驗結果，直接將真空度抽到這么低，泡沫極容易破裂，甚至會導致噴瓶，因此進行泡沫冷凍干燥實驗時采取分階段抽真空的方法，發泡階段的真空度水平根據初步實驗選取范圍為50~200 Pa。從本文實驗結果來看，只要發泡達到一定效果，如表2 中最小的13 mm，與初始裝液高度比為5.2，對于一次干燥時間的影響有限。對于二次干燥時間的影響，作者由于實驗條件的限制未加開展研究，但從傳熱傳質理論出發，能夠預計到隨著發泡效果變好二次干燥時間會縮短。根據第二部分實驗結果，對于1 ml 樣品采用泡沫真空冷凍干燥技術達到剩余含水量低于2%，耗時不超過16 h，該時間約為傳統冷凍干燥耗時的一半。

3、小結

　　作為一種新興的干燥技術，泡沫真空冷凍干燥既能保持冷凍干燥帶給制品的一些優點，還能縮短生產時間、降低生產能耗，在生產效率和成本方面具有一定優勢。本文對含有常見凍干保護劑蔗糖的溶液進行了泡沫真空冷凍干燥實驗，對可能影響泡沫生成和穩定的四個因素進行了正交實驗研究，并對應用發泡效果最佳的因素組合生產的樣品的剩余含水量予以檢測。在干燥時間明顯縮短的情況下樣品剩余含水量也能達到低于2%的水平。本文所得結果對泡沫真空冷凍干燥工藝的開發具有指導價值。